所有知道PCR實(shí)驗(yàn)室的人都知道,PCR實(shí)驗(yàn)室使用聚合酶鏈反應(yīng)來(lái)擴(kuò)增特定的DNA片段,這些片段可以在體外進(jìn)行,而不依賴大腸桿菌或酵母等生物體。PCR技術(shù)也廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)和生物實(shí)驗(yàn)室。因此,PCR實(shí)驗(yàn)室的清潔要求也比一般實(shí)驗(yàn)室的要求更嚴(yán)格。
PCR實(shí)驗(yàn)室的潔凈度主要是通過(guò)人工手段,利用清洗技術(shù)控制室內(nèi)空氣粉塵、細(xì)菌濃度、溫濕度和壓力,以達(dá)到所需的潔凈度、溫濕度和氣流速度等環(huán)境參數(shù)。"這樣,既可以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,又能使工作人員遠(yuǎn)離可能的感染等。PCR實(shí)驗(yàn)室的清洗要求一般采用兩級(jí)隔離,第一種是通過(guò)生物安全柜、負(fù)壓隔離器、正壓防護(hù)服、手套、眼罩等進(jìn)行隔離;第二種隔離是通過(guò)實(shí)驗(yàn)室大樓、空調(diào)凈化和電氣控制系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)的。
然而,由于PCR實(shí)驗(yàn)室凈化空調(diào)的風(fēng)量很小,為了安全起見(jiàn),對(duì)風(fēng)量的估計(jì)是根據(jù)較大的估計(jì),這通常超出了標(biāo)準(zhǔn)。目前有一種專用的PCR實(shí)驗(yàn)室凈化空調(diào)裝置,可直接利用和解決。普通PCR實(shí)驗(yàn)室配備:超清潔工作臺(tái)、生物安全柜、側(cè)臺(tái)或不銹鋼手術(shù)臺(tái)、洗滌臺(tái)等。PCR實(shí)驗(yàn)室通常分為四個(gè)區(qū)域,即試劑貯存和制備區(qū)、樣品制備區(qū)、放大反應(yīng)混合物制備區(qū)和擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)(如果使用自動(dòng)分析儀,則可以適當(dāng)?shù)睾喜⒃搮^(qū)域)。
進(jìn)入每個(gè)區(qū)域必須嚴(yán)格按單方向進(jìn)行,不同工作區(qū)域使用不同工作服(如不同顏色),工作人員離開(kāi)時(shí)不得拿出工作服。試劑儲(chǔ)存制備室(樣品制備區(qū)),儀器主要配備:冷凍離心機(jī),生物安全柜,冰箱,可拆卸UV燈,全自動(dòng)力核酸蛋白純化儀,專用工作服和工作鞋等。擴(kuò)增反應(yīng)混合物的制備及擴(kuò)增區(qū)的配置如下:冰箱,高速離心機(jī),超凈工作臺(tái),PCR儀(需負(fù)壓狀態(tài)),可移動(dòng)UV燈,微量取樣器,核酸膨脹機(jī)等。擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)主要配備移液器,振蕩器,超凈工作臺(tái),毛細(xì)管電泳儀,冰箱,離心機(jī),微量采樣器,活動(dòng)UV燈等。